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Escherichia coli DH10Bac
Escherichia coli DH10Bac
規(guī)格:
貨期:
編號(hào):B98167
品牌:Mingzhoubio

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產(chǎn)品名稱 Escherichia coli DH10Bac
商品貨號(hào) B98167
基因型 F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ-rpsL nupG / pMON14272 / pMON7124。
基本信息 DH10Bac是昆蟲(chóng)桿狀病毒Bac-to-Bac系統(tǒng)中常用的同源重組大腸桿菌菌株。該菌株含有桿狀病毒穿梭載體(baculovirus shuttle vector) bMON14272(俗稱bacmid,其含有一個(gè)轉(zhuǎn)座反應(yīng)必須的mini-attTn7重組位點(diǎn))和一個(gè)輔助質(zhì)粒pMON7124(用于表達(dá)轉(zhuǎn)座所需的轉(zhuǎn)座蛋白)。DH10Bac主要用作pFastBac等類似載體轉(zhuǎn)化的宿主菌株。當(dāng)pFastBac重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)入DH10Bac細(xì)胞后,pFastBac載體上的mini-Tn7位點(diǎn)和DH10Bac宿主菌中bacmid上的mini-attTn7位點(diǎn)之間發(fā)生轉(zhuǎn)座(transposition),產(chǎn)生重組的bacmid。重組的bacmid在轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞后可產(chǎn)生含有重組子的桿狀病毒,后者進(jìn)一步感染昆蟲(chóng)細(xì)胞后即可啟動(dòng)外源重組蛋白的表達(dá)。 DH10Bac宿主包含的bacmid bMON14272含小型F復(fù)制子,卡那霉素抗性基因,mini-attTn7位點(diǎn)和lacZα互補(bǔ)因子(可通過(guò)藍(lán)白斑篩選);輔助質(zhì)粒pMON7124包含四環(huán)素抗性和tnsABCD區(qū)域,該區(qū)域表達(dá)轉(zhuǎn)座反應(yīng)所需的轉(zhuǎn)座蛋白。攜帶T7轉(zhuǎn)座原件(Tn7 element)的供體質(zhì)粒pFastBac (donor pFastBac plasmid)帶有慶大霉素抗性基因,桿狀病毒多角體啟動(dòng)子,多克隆位點(diǎn)區(qū)域和SV40的多腺苷酸化信號(hào)。
菌株簡(jiǎn)介 DH10Bac菌株具有卡那霉素抗性和四環(huán)素抗性,pFastBac質(zhì)粒具有慶大霉素(Gentimicin)抗性和氨芐青霉素抗性。重組后的克隆用藍(lán)白斑進(jìn)行篩選,重組成功的克隆在含有卡那霉素和四環(huán)素抗性的IPTG/X-Gal LB平板上呈現(xiàn)為白色菌落。 本菌株可以使用常規(guī)的LB培養(yǎng)基或SOC培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
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