| 產(chǎn)品名稱 |
人原代食管平滑肌細(xì)胞 |
| 商品貨號 |
MZ-3552 |
| 組織來源 |
正常人食管組織 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
| 培養(yǎng)基 |
DMEM高糖培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、平滑肌細(xì)胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等（建議購買原代食管平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基） |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。食管平滑肌集中在肌層，僅在食管的下 2/3段存在，其中中段的 1/3位骨骼肌和平滑肌混合組成，下 1/3段全部為平滑肌，而上段?? 1/3 全部為骨骼肌。 食管的運(yùn)動，上部的橫紋肌受舌咽神經(jīng)和迷走神經(jīng)的支配，這些運(yùn)動神經(jīng)元末梢以運(yùn)動終板形式進(jìn)入骨骼肌。迷走神經(jīng)尚支配食管其余部分的平滑肌，其節(jié)前纖維末梢與食管壁內(nèi)神經(jīng)叢的節(jié)細(xì)胞發(fā)生突觸聯(lián)系，再發(fā)出節(jié)后纖維支配平滑肌細(xì)胞。在吞咽時，吞咽中樞興奮通過上述運(yùn)動神經(jīng)元和迷走神經(jīng)傳出纖維，引起食管各段的肌肉發(fā)生蠕動。食管壁內(nèi)神經(jīng)叢可以不依賴外來神經(jīng)來控制食管蠕動。細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 主要功能 |
（1） 主要功能是負(fù)責(zé)食管的收縮蠕動，推動食物向下運(yùn)動。 （2） 平滑肌的收縮可能是通過增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度或激活G 蛋白，激活磷脂酶， 并激活PKC-epsilon 依賴的信號通路。 （3） 食管平滑肌細(xì)胞可以表達(dá)Na（+）通道。 |
| 主要病生理變化 |
（1） 食管癌。 （2） 食管炎。 |
