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浙江省寧波市鎮海區莊市街道興莊路9號
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產品名稱	小鼠椎間盤髓核細胞
商品貨號	MZ-545
組織來源	昆明、C57小鼠（3-4周）2-3只
規格	5×105cells/T25培養瓶
生長特性	貼壁
細胞形態	梭形、多角形
培養基	DMEM-F12培養基，含FBS、軟骨細胞生長添加劑、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
細胞污染	HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述	髓核是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結構的一部分，位于兩軟骨板與纖維環之間。由縱橫交錯的纖維網狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質。髓核細胞的過早衰老與凋亡是導致椎間盤退行性變過程的主要原因之一，主要表現為退變椎間盤內髓核細胞功能降低和數量減少，使得其Ⅱ型膠蛋白聚糖等基質分泌量下降，最終導致椎間盤維持脊柱高度、承受各方應力等生物力學功能喪失。
細胞傳代步驟	如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟	將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟	待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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